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武漢愛基百客生物科技有限公司(簡稱愛基百客),位于武漢高農(nóng)生物園,辦公面積逾3000平方米,是一家專注于表觀組學(xué)、單細(xì)胞時(shí)空組學(xué)和高通量測序分析服務(wù)的新型生物科技企業(yè)。


公司旨在為客戶提供專業(yè)的科研服務(wù),運(yùn)營至今合作的科研客戶近千家,涵蓋國內(nèi)知名科研院所、高校以及相關(guān)生物企業(yè),運(yùn)營至今銷售額超1億元,科研成果曾多次在Science、Cancer Cell、Plant Cell、Nature Communications、J HEMATOL ONCOL等國際高水平學(xué)術(shù)期刊發(fā)表,受到了客戶廣泛好評,是國內(nèi)成長最迅速的多組學(xué)科研服務(wù)企業(yè)之一。

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科技服務(wù)

详细说明

DAP-seq

  • 產(chǎn)品介紹
  • 案例分享

DAP-seq(DNA affinity purification sequencing)

產(chǎn)品介紹:

DAP-Seq是將蛋白質(zhì)體外表達(dá)技術(shù)與高通量測序技術(shù)相結(jié)合,使用體外表達(dá)的TF蛋白對裸露的全基因組DNA片段進(jìn)行孵育,以確定結(jié)合序列。

通過提取基因組DNA,進(jìn)行基因DNA文庫構(gòu)建。隨后利用HaloTag載體,將目的蛋白HaloTag融合表達(dá),將純化的融合蛋白與基因組文庫進(jìn)行孵育,利用目的蛋白結(jié)合DNA片段,并且利用HaloTag特異性磁珠,將目的蛋白DNA復(fù)合物進(jìn)行提取與純化,隨后對捕獲的DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增,測序分析,探究目的蛋白結(jié)合的DNA片段。

DAP原理圖.png

DAP-seq實(shí)驗(yàn)流程


分析流程:

DAP分析流程.png


產(chǎn)品優(yōu)勢:

DAP產(chǎn)品優(yōu)勢.png


項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)

DAP項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn).png


樣本要求:

植物組織5g

包含轉(zhuǎn)錄因子CDS序列的質(zhì)粒:1-2μg(質(zhì)粒濃度為200 ng/μL)。(需保證質(zhì)粒測序結(jié)果無誤)


建庫測序:

測序策略:NovaSeq6000, PE150

測序深度6-12 G


項(xiàng)目周期:

60個(gè)工作日


案例分析

【項(xiàng)⽬⽂章】WRKY27-RAP2.7調(diào)控模塊通過調(diào)節(jié)肉桂醇脫氫酶7和谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶F6,以此調(diào)控木質(zhì)素生物合成和氧化還原穩(wěn)態(tài),進(jìn)而促進(jìn)耐冷性

WRKY27-RAP2.7 Regulatory Module Promotes Cold  Tolerance via Modulation of Lignin Biosynthesis and  Redox Homeostasis by Regulating Cinnamyl Alcohol  Dehydrogenase 7 and Glutathione S-Transferase F6

期刊:Plant Biotechnology Journal|影響因⼦:10.5|發(fā)表時(shí)間:2025年|發(fā)表單位:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)


研究背景:

  低溫脅迫會(huì)對植物的生長發(fā)育產(chǎn)生不利影響,嚴(yán)重制約柑橘果實(shí)的產(chǎn)量和品質(zhì)。宜昌橙(Citrus ichangensis)作為一種耐寒柑橘種質(zhì),是研究耐寒適應(yīng)性的寶貴遺傳資源,但目前關(guān)于其低溫脅迫響應(yīng)背后的關(guān)鍵基因及其作用機(jī)制仍鮮有探索。

研究結(jié)果:

通過DAP-seq和RNA-seq揭示了通過調(diào)控CiCAD7介導(dǎo)的桔皮素生物合成和CiGSTF6依賴的ROS清除來調(diào)節(jié)抗寒性,此外,CiWRKY27還與受其調(diào)控的CiRAP2.7蛋白相互作用,形成一個(gè)關(guān)鍵的抗寒調(diào)控模塊。為深入了解低溫脅迫下桔皮素生物合成和ROS穩(wěn)態(tài)的分子調(diào)控機(jī)制提供了有價(jià)值的信息,為柑橘等作物抗寒性的改良提供了有前景的分子模型。

image.png

圖3 基于 DAP-seq 技術(shù)的CiWRKY27結(jié)合位點(diǎn)全基因組鑒定




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